Heiß-Anfang Taq-Enzym ist weitverbreitet. Verglichen mit gewöhnlicher DNA-Polymerase, kann Heißanfang Taq-Enzym irgendeine unspezifische Verstärkung und die Bildung von Zündkapseldimern effektiv vermeiden und kann die Erfolgsquote der Zielgenverstärkung effektiv verbessern. Besonders auf dem Gebiet von Gentests, ist Heißanfang Taq-Enzym als obligatorischer Standard in der Industrie identifiziert worden, und gewöhnliche DNA-Polymerase sollte nicht benutzt werden. Kann vom oben genannten, Heißanfang Taq-Enzyme so gesehen werden sind weitverbreitet. Zur Zeit gibt es viele Marken von Heißanfang Taq-Enzymen auf dem Binnenmarkt, aber es gibt nicht viele Heißanfang Taq-Enzyme mit hoher Qualität. Gegenübergestellt mit so vielen Heißanfang Taq-Enzympräparaten, wie sollten wir wählen?
1. Wählen Sie das Heißanfang Taq-Enzym mit hoher Verstärkungs-Leistungsfähigkeit vor
Pcr-Verstärkungs-Leistungsfähigkeit ist zur Leistung von Taq-Enzym eng verwandt. Nach guter Taq-Enzymreaktion wird ein System optimiert, ist die Verstärkungs-Leistungsfähigkeit über 95%, und die Verstärkungsstrecke der Anfangsschablonenmenge ist breit. Zufriedenstellende Verstärkung kann erreicht werden, wenn der Zielgeninhalt niedrig ist und vergiftet zu werden nicht ist einfach, wenn die Schablonenmenge hoch ist, und der exponentiale Verstärkungszeitraum ist lang. Für das Taq-Enzym mit schwacher Leistung, selbst wenn das Reaktionssystem zu vielen Malen optimiert worden ist, ist die Verstärkungs-Leistungsfähigkeit noch kleiner als 90%, liegt die „s-“ Form der Verstärkungskurve nicht auf der Hand, ist die Steigung klein, und die Kurve ist flach. Wenn die Menge der Schablone niedrig ist, kann sie nicht verstärkt werden, und wenn die Menge der Schablone hoch ist, ist der Verstärkungseffekt nicht ideal. Deshalb ist die Auswahl von DNA-Polymerasen mit hoher Verstärkungs-Leistungsfähigkeit zum Erfolg von PCR und von qPCR entscheidend.
2. Ausgewähltes Heißanfang Taq-Enzym mit starker Enzymenergie
Die enzymatische Energie des Taq-Enzyms hängt mit der Verstärkungs-Leistungsfähigkeit zusammen. Im Allgemeinen das stärker die enzymatische Energie des Heißanfang Taq-Enzyms, das länger der Zeitraum des exponentiellen Wachstums von PCR-Verstärkung, typischer ‚S-förmige‘ die Kurve, das höher der Fluoreszenzsignalwert und das passendere für Multiplex-PCR-Entdeckung. Marke DNA-Polymerasen mit schwacher enzymatischer Energie können 2 plex Reaktionen im Allgemeinen nur stützen. Wenn sie 3 plex Reaktionen tut, die Verstärkungskurve ist niedrig, ist der Fluoreszenzsignalwert niedrig, und es gibt keine typische Verstärkungskurve, also sind die Ergebnisse schwierig zu urteilen.
3. Wählen Sie ein Heißanfang Taq-Enzym mit hoher Empfindlichkeit vor
Im allgemeinen hat DNA-Polymerase hohe Verstärkungs-Leistungsfähigkeit und hohe Empfindlichkeit, aber es gibt auch Inkonsequenzen. Wenn der Zielgenüberfluß an der verstärkt zu werden Probe niedrig ist, wird es empfohlen, um die Verstärkungsempfindlichkeit von Taq-Enzym zu prüfen. Die allgemeinste Nachweismethode ist, 10fache oder 5fache Steigungsverdünnung des Zielgen-Plasmidfragments durchzuführen, führt PCR-Entdeckung an der niedrigeren Verdünnung durch und wählt das Heißanfang Taq-Enzym mit höherer Entdeckungsempfindlichkeit vor.
Es kann vom oben genannten gesehen werden, das Forscher entsprechend ihren eigenen experimentellen Anforderungen und Finanzierungsbedingungen wählen müssen. Es ist am besten, ein Steigungsverdünnungs-Verstärkungsexperiment zu tun, um die Verstärkungs-Leistungsfähigkeit und die Empfindlichkeit des Heißanfang Taq-Enzyms zu ermitteln.
Ein Beispiel von Foregenes Taq DNA-Polymerase:
Foreasy HS Taq DNA-Polymerase
Beschreibung
Foreasy HS Taq DNA-Polymerase ist eine DNA-Polymerase ausdrückte in Escherichia Coli, die Bakterien durch Genrekombinationstechnologie ausführt. Das Enzym wird mit einem einzigartigen Reaktion buffffer kombiniert, das das Produkt in hohem Grade beständig und kompatibel macht, und kann das Beispiel-lysate (Foregene-Zerstörungssystem) als Schablone für Nachweisreaktionen direkt benutzen.
Anwendung
Qualitativer PCR und quantitative PCR-Entdeckung von purifified Schablonen und von nicht--purifified Schablonen.
Qualitätskontrolle
1. Keine exogene Nukleasetätigkeit ermittelte
Methode 2.PCR, zum residuell genomischer DNA ohne Wirt zu ermitteln
3.It kann Einzelkopiengene im menschlichen Genom effffectively verstärken
4.Store bei Zimmertemperatur für eine Woche, noobvious Tätigkeitsänderungen
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