MISCHUNGS-Ausrüstungen RT-PCR EasyTM I FOREGENE eins Vorlagenschritt-RT-PCR für QPCR-Reaktion

Ein-RT-PCR Vorlagenmischungs-Ausrüstungen RT-PCR EasyTM I (ein Schritt) FOREGENE für qPCR Reaktion

RT-PCR EasyTM I (ein Schritt)

Cat.No.RT - 02011/02012

Ein-RT-PCR Vorlagenmischung

Für nur Forschungsgebrauch

Speicher an -20℃

Produkteinführung

Verwirklichen Ein-RT-PCR EasyTM Reihenprodukte Foregene, dass die integrierte Reaktion von der RNS zu doppelsträngiger DNA d.h. Übertragung aufheben und PCR-Verstärkung im gleichen Reaktionszentrifugenrohr abgeschlossen werden und das gleiche Reaktionssystem, das die experimentellen Schritte vereinfacht, das experimentelle Programm optimiert und die Experiment-Leistungsfähigkeit verbessert.

RT-PCR EasyTM I (ein Schritt) ist eine Ein-RT-PCR Ausrüstung, die besonders durch Foregene entwickelt wird, das Dauerbetrieb von Funktelegrafie zu PCR im gleichen Rohr verwirklicht. Die Operation ist einfach und schnell, die die Verschmutzung während des Experimentes effektiv verringern kann. 2×RT-PCR EasyTM Mischung hat starke Toleranz, Wärmebeständigkeit, hohe Leistungsfähigkeit und Besonderheit für Verstärkung.

Eigenschaften

Die Einausrüstung ermöglicht im gleichen Rohr durchgeführt zu werden Rückübertragung und PCR. Sie muss nur Schablone RNS, spezifische PCR-Zündkapseln und RNase-freies ddH2O addieren.

Quantitative Realzeitanalyse von RNS kann schnell und genau durchgeführt werden.

Die Ausrüstung benutzt eine einzigartige Foregene-Rückseitenübertragungsreagens und Foregene HotStar Taq DNA-Polymerase, die mit einem einzigartigen Reaktionssystem kombiniert wird, um die Verstärkungs-Leistungsfähigkeit und die Besonderheit der Reaktion effektiv zu verbessern.

Das optimierte Reaktionssystem macht die Reaktion haben höhere Entdeckungsempfindlichkeit, stärkere Wärmebeständigkeit und bessere Toleranz.

Kit Contents

Transport und Lagerbedingungen

Zustände 1.Transportation

Der ganze Prozess des niedrigtemperatureiskastentransportes, garantieren, dass die Ausrüstung in einem Zustand von ist <4>

2. Lagerbedingungen

Funktelegrafie EasyTM werde ich an -20°C. speichere das Produkt in einem Kühlschrank der konstanten Temperatur an -20°C sofort nach dem Empfang gespeichert. Wenn die Lagerbedingungen angebracht sind, vermindert das Produkt keine Leistung während des 1-jährigen Gültigkeitszeitraums.

Ausrüstungsteilinformationen

Mischung 2× RT-PCR EasyTM: Foregene-Rückseite Transkriptase, RNase-Hemmnis, Foregene HotStar Taq DNA-Polymerase, dNTPs, Mg2+, Reaktionspuffer, Optimierer und Stabilisator, etc.

Vorkehrungen: (Lesen Sie bitte die Vorkehrungen sorgfältig vor der Anwendung der Ausrüstung)

Für Schablonen wird es empfohlen, um die RNS zu benutzen, die von den frischen Proben extrahiert wird oder an -80℃ gespeichert ist (RNS sollte das wiederholte Einfrieren und das Auftauen vermeiden).

Um RNaseverschmutzung zu vermeiden, sollte die Experimentarbeit im RNase-freien Raum durchgeführt werden; die Pipettenspitzen und DIE PCR-Zentrifugenrohre, die benutzt werden, müssen RNase-frei sein; und Wegwerfhandschuhe und Masken sollten getragen werden. Vor Gebrauch setzen Sie die 2×RT-PCR EasyTM Mischung auf Eis vollständig zur Schmelze, zum leichten Schlag und zur Mischung lange vor Gebrauch; die Vorbereitung des Systems sollte auf einem Eisbad bearbeitet werden, um die Leistung der Ausrüstung und die Besonderheit von PCR-Verstärkung zu verbessern.

Schablone RNS-Konzentration

RT-PCR EasyTM I (ein Schritt): (Gesamt-0.1pg-1μg RNSsystem)/20μl

Operationsführer

: Vorbereitung von Materialien und von Reagenzien

1. Bereiten Sie die vorbereitete RNS-Schablone (es wird empfohlen, um Foregene-Gesamt-RNS Isolierungs-Ausrüstungs-Reihenausrüstungen zu benutzen, um RNS zu extrahieren und zu reinigen), spezifische Zündkapseln (10μM) und in Verbindung stehende Verbrauchsmaterialien und Instrumente vor.

Anmerkung: Stellen Sie bitte die Integrität von RNS sicher und versuchen Sie, die RNS zu benutzen, die von den frischen Proben extrahiert wird.

2. Mischung des Platz-2× RT-PCR EasyTM und RNase-freie ddH2O auf einem Eisbad, zum es natürlich schmelzen zu lassen und schlagen die Rohrwand, um gut für die spätere Verwendung zu mischen.

B: RT-PCR Systemvorbereitung

2×RT-PCR EasyTM Mischung ist bequem und schnell zu verwenden und vermeidet Verschmutzung während der Operation und experimenteller Fehler, die in größtem Maße durch mehrfache Vorbereitungen des Reaktionssystems verursacht werden. Bei der Anwendung, nur addieren Hälfte Volumen des Reaktionssystems (zum Beispiel, wenn das Reaktionssystem 20μl ist, Nehmen 10μl 2×RT-PCR EasyTM Mischungslösung), passende Menge RNS-Schablone und spezifische Zündkapseln und addieren RNase-freies ddH2O, um das Volumen zu bilden. Siehe Tabelle 1 unten für die spezifische RT-PCR Reaktionssystemvorbereitung.

Form 1: RT-PCR Systemvorbereitung

1*: Normalerweise ist die abschließende Konzentration der Zündkapsel 0.2-0.25μM, zum von besseren Ergebnissen zu erhalten. Wenn die Reaktionsleistung arm ist, kann die Zündkapselkonzentration innerhalb des Bereiches 0.1-0.5μM justiert werden.

Anmerkung: Vorwärtszündkapsel und Rückzündkapsel sind die spezifischen Zündkapseln für das Zielgen; System 50μl, beziehen bitte sich das auf System 20μl, um die Reagensdosierung proportional zu justieren.

C: RT-PCR Reaktions-Programmeinstellung

• Nachdem leicht das RT-PCR System mit Bezug auf die oben genannte Tabelle, Mischung vorbereitet worden ist (Sie können Pipettenspitze verwenden, um leicht durchzubrennen; Sie können auf einem vortexer und einer Zentrifuge, zum der Flüssigkeit zu sammeln, die für die spätere Verwendung auf die Rohrwand oder die Rohrkappe zerstreut wird, und einem Platz auf Eiskasten auch kurz mischen).

2. Beziehen Sie sich die auf RT-PCR Reaktions-Programmeinstellungen (die Tabelle 2), zum der Temperatur und der Zeit der Reaktion einzustellen.

Anmerkung: Nach der Einstellung des PCR-Instrumentprogramms um die Tätigkeit von 2×RT-PCR EasyTM Mischung sicherzustellen und seine Verstärkungs-Leistungsfähigkeit zu verbessern, ist es am besten das RT-PCR Reaktionssystem vorzubereiten, damit das Reaktionsprogramm eingeführt werden kann sofort nachdem das System vorbereitet wird.

Form 2: RT-PCR Reaktionssystemeinstellung

Anmerkung: Das oben genannte Verfahren ist als nur Referenz. Die tatsächlichen Reaktionszustände schwanken abhängig von den baulichen Zuständen der Schablone, der Zündkapseln, des etc. Für RNS-Schablonen mit komplexen Sekundärstrukturen, wird die Reaktionstemperatur für den ersten Schritt der Rückübertragung empfohlen, um 50°C. zu sein. Im Einzelgeschäft ist es notwendig, die optimalen Reaktionsbedingungen, einschließlich Vergütungstemperatur, Erweiterungszeit, etc. entsprechend den besonderen Bedingungen der Zielfragmentgröße zu entwerfen, die Basensequenz des verstärkten Fragments und der GASCHROMATOGRAPHIE-Inhalt und die Länge der Zündkapsel.
RT-PCR Operations-Diagramm